Паратуберкулез. Возбудитель - Mycobacterum paratuberculosis (М

Возбудитель - Mycobacterum paratuberculosis (М. johnei) - неподвижная аэробная палочка, спор и капсул не образует. Устойчива к кислотам, спиртам и антиформину. Грамположительна, окрашивается по Цилю - Нильсену и аура­мин-родамином.

Материал для исследования: а) отрезки, (3-5) пораженных участков кишечника и обязательно подвздошной кишки, илеоцекальная заслонка и, отдельно; б) прилегающие к ним лимфоузлы (в 30%-ном глицерине); в) фекалии с комоч­кaми слизи и примесью крови (в отдельной банке).

Исследование проводят микроскопически и в необходимых случаях бактерно­логически.

Микроскопия. Из патологического материала мазки-отпечатки делают поверх­ностью свежего разреза пораженной стенки кишки или лимфоузла. Комочки слизи из фекалий и обрывки слизистой оболочки кишечника растирают между предметными стеклами. Сконцентрировать микробы в пробах фекалий можно с применением способов, описанных в разделе Туберкулез.

Из всех органов и материалов готовят по 4-6 мазков в двух сериях. Одну серию окрашивают по Цилю - Нильсену, а другую аурамин-родамином и мик­роскопируют. При обнаружении кислотоустойчивых или характерно флуоресцирующих бактерий, расположенных гнездно или глыбками в клетках пораженной ткани, ставят положительный диагноз. Если искомые бактерии единичны или отсутствуют, готовят новые серии мазков с обязательным применением приемов обогащения (см. Туберкулез), и микроскопию повторяют.

Бактериологическое исследование проводят только в необходимых случаях. Кусочки лимфоузлов и отдельно соскобы (ткань) пораженных участков слизистой и подслизистой оболочек кишечника по 4-5 г измельчают ножницами 2-3 мм, помещают в разные стерильные ступки, покрытые стерильной пер­гаментной бумагой. Пробу из лимфоузлов заливают 3%-ным раствором серной кислоты в соотношении 1: 10, а из кишечника - 6%-ным раствором серной кис­лоты и выдерживают 10-15 мин. Затем кислоту отсасывают. а материалы наливают физиологическим раствором соответственно на 5 и 10 мин. физиологи­ческий раствор сливают, а кусочки тканей растирают и суспендируют в равных объемах физиологического раствора.

Посевы делают на модифицированную среду Дюбо - Смита и для контро­ля - на среду Петраньяни. Техника посева та же, что и при исследовании на туберкулез.

Посевы инкубируют при 38 ос в течение 3-4 месяцев. Через 1-2 дня во из­бежание высыхания среды пробки срезают и заливают парафином. Спустя две недели посевы просматривают, пользуясь лупой, раз в 5 дней. Рост может быть заметен через 18-20 дней или позднее. Выделенную культуру пересевают на модифицированную среду Дюбо - Смита с фактором роста и без него (конт­роль).

Ускоренное выявление пара туберкулезных бактерий по О. А. Поляковой.

Подготовку материала к высевам проводят так же. Высевы на полоски мембран делают, как и при ускоренном исследовании на туберкулез. Подращивание ве­дут на среде Дюбо - Смита с экстрактом из М. ph1ei. Люминесцентную микро­скопию для обнаружения возбудителя проводят через 7, 10 и 15 дней инку­бации.