Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:
1) с использованием флуориметрического и фармакологического анализов определить участие аденилатциклазного, фосфоинозитидного и тирозинкиназного путей в обонятельной трансдукции амилового спирта, камфоры, цинеола, амилацетата, ванилина, аммиака и сероводорода;
2) исследовать компоненты сигнальных систем, участвующих в рецепции каждого из перечисленных одорантов;
3) изучить влияние пахучих стимулов на активность дыхательной цепи митохондрий рецепторных клеток;
Выявить характер изменений двигательной активности обонятельных жгутиков при действии одорантов и исследовать роль актинового компонента цитоскелета в этом процессе.
ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ
Обонятельная рецепция обеспечивается гетерогенными механизмами трансдукции. Гетерогенность обонятельной рецепции проявляется в следующих феноменах: - в рецепторные процессы, обеспечивающие восприятие веществ, обладающих разными запахами, вовлекаются различные сигнальные системы;
- если в рецепцию одорантов включаются одинаковые пути трансдукции, то компоненты этих путей различны;
- в обонятельной рецепции одорантов, имеющих острый и гнилостный запахи, внутриклеточные сигнальные системы не участвуют;
- действие на митохондриальное дыхание качественно разных одорантов принципиально различно;
- качественно разные одоранты по-разному изменяют двигательную активность обонятельных жгутиков.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ. Благодаря проведению комплексного исследования механизмов обонятельной трансдукции, клеточного метаболизма, двигательной активности обонятельных жгутиков, роли цитоскелета и электрофизиологических реакций в рецепторных клетках обонятельной выстилки лягушки при стимуляции одорантами, имеющими разные запахи, впервые выявлены гетерогенные механизмы обонятельной рецепции.
Гетерогенность проявляется в том, что в рецепторные процессы, обеспечивающие восприятие веществ, обладающих разными запахами, вовлекаются различные сигнальные системы: в рецепцию веществ, обладающих прогорклым, эвкалиптовым и фруктовым запахами, - цАМФ, а в рецепцию одорантов с камфорным и цветочным запахами – 1,4,5-трифосфоинозитиды. При этом у веществ, входящих в одну группу химических соединений, в механизме трансдукции участвуют различные сигнальные системы обонятельных клеток.
Впервые показано, что гетерогенность обонятельной трансдукции проявляется и в том, что при участии в рецепции разных одорантов одной и той же сигнальной системы ее компоненты могут быть различными. Так, под действием ванилина и камфоры в обонятельных клетках стимулируется гидролиз фосфоинозитидов. Однако в восприятии ванилина участвует Golf-белок, а камфоры нет.
Впервые выявлено, что для восприятия веществ с камфорным и эвкалиптовым запахами необходимо участие тирозинкиназы, передающей сигнал далее на эффекторные белки: фосфолипазу С для камфоры и аденилатциклазу – для цинеола.