2015-06-05
1359
Метод основан на способности бактерий группы кишечных палочек сбраживать в среде Кесслера лактозу с образованием кислоты и газа. Бактерии группы кишечных палочек (БГКП) — это аэробные и факультативно_анаэробные, грамотрицательные, не образующие спор палочки, ферментирующие лактозу с образованием кислоты и газа при температуре +37_С в течение 24 ч (бродильная проба), не обладающие окислительной способностью.
Для индикации БГКП в исследуемом материале 10 г продукта и 10 мл исходного разведения продукта помещают во флаконы со 100 и 50 мл питательной среды соответственно. По 1 и 0,1 мл и так далее исходного разведения продукта вносят в про_
бирки с 5 мл питательной среды.
По действующим нормативам обязательно засевается то количество продукта, в котором нормируется отсутствие бактерий группы кишечных палочек. Допускается засевать 1 г продукта в 10 мл питательной среды.
Для индикации БГКП в смывной жидкости с оборудования и рук тампоны или марлевые салфетки погружают в пробирки с 5 мл среды Кесслера. Посевы помещают в термостат при температуре +37_С на 24 ч, затем из пробирок и колб с признаками роста бактерий делают посев на плотную дифференциальную среду Эндо.
|
|
|
Через сутки после инкубирования в термостате проводят учет. При наличии на среде Эндо колоний (розовых, красных с металлическим блеском и без него), характерных для БГКП, проводят их изучение. Из изолированных колоний готовят препараты, окрашивают по Граму и микроскопируют. При наличии грамотрицательных палочек без спор делают заключение о присутствии БГКП. Для уточнения при обнаружении грамотрицательных, не образующих спор палочек надо провести оксидазный тест: часть колонии со среды Эндо наносят штрихом на фильтровальную бумагу, предварительно смоченную реактивом для определения цитохромоксидазы. Оксидазный тест у кишечной палочки отрицательный, и индикаторная бумага не должна изменять цвет, если бумага синеет — оксидазный тест положительный.
