Для демонстрації фізіологічних процесів і функцій, що мають місце в організмі, необхідні піддослідні тварини. Під час експериментів на лабораторно-практичних заняттях переважно
використовують жаб, оскільки їх утримання не потребує значних витрат. Вони є найкращим об'єктом для проведення операцій, особливо під час вивчення фізіології нервів та м'язш, кровообігу, центральної нервової системи. Для дослідження фізіології травлення, дихання, вищої нервової діяльності, аналізаторів використовують собак і сільськогосподарських тварин (овець, телят, свиней, коней). У разі потреби на цих тваринах можна проводити операції накладання хронічних фістул на різні відділи шлунково-кишкового тракту.
Тварин слід обирати здорових, з коротким волосяним покривом і широкою грудною кліткою. Для експериментів можна використовувати мишей, пацюків, кролЬз, курей, голубів та інших тварин. Всі вони потребують належного утримання, годування, догляду, особливо тварини з хронічними фістулами.
|
|
Жаб краще селити у віварії восени, коли вони мають добрий фізіологічний тонус. Взимку їх слід утримувати у ваннах з проточною водою. Зафіксувати цих тварин під час експерименту неважко. Спочатку роблять декапування, тобто ножицями відрізають верхню щелепу жаби позаду очей (рис. 1, а), а потім їх знерухомлюють, руйнуючи спинний мозок (рис. 1, б). В експериментах, де необхідно мати не-
ушкоджений спинний мозок, жаб фіксують шпильками на коркових дощечках, В разі потреби їх наркотизують під скляним ковпаком, куди кладуть ватний тампон, змочений ефіром.
Кролів і собак фіксують на дошках з головотримачами та отворами для мотузок (рис. 2). Для фіксації великих тварин використовують
спеціальні станки (рис. 3). У разі їх відсутності тварин тримають за допомогою мотузної петлі або прив'язують за роги. Якщо цього недостатньо, використовують відвертаючі засоби — здавлювання носогубного дзеркала пальцями, носовими щипцями (рис. 4, а) або носовим затискачем Кульсієва (рис. 4, 6). Під час небольових досліджень на конях необхідно підняти одну з передніх кінцівок, зігнути її у за-п'ясному суглобі й зафіксувати (рис. 5).
сувати фис. Ъ).
При проведенні операцій в грудній і черевній порожнинах тварин фіксують в станках, спеціально виготовлених для різних видів тварин (рис. 6, а — стіл Виноградова, б — стіл Гай-дановського і Розенблюма). Перед цим їх знерухомлюють за допомогою загального наркозу або місцевої анестезії. Це необхідно в разі виконання гострих дослідів, після яких тварина умертвляється значною дозою наркотичної речовини.
Овець, кіз, телят найкраще наркотизувати перорально (через рот) алкоголем —розбавленим спиртом (40 %-й) або горілкою з розрахунку 1,5-2 мл на 1 кг живої маси.
|
|
Собак наркотизують інгаляцією суміші ефіру з хлороформом в співвідношенні 1:3, попередньо ввівши під шкіру 1 %-й
солянокислий морфін з розрахунку 1 мл на 1 кг живої маси. Коли тварина вже перебуває в сонливому стані, їй на морду накладають маску з ватним тампоном, змоченим сумішшю ефіру з хлороформом. Слід пам'ятати, що введення морфіну в собак може викликати блювання і дефекацію, тому їх краще наркотизувати на подвір'ї. Крім того, собак можна наркотизувати також ін'єкцією в черевну порожнину етаміналом натрію. Для невеликої собаки необхідно 3 таблетки по 0,1г, а для великої — 4—5, які слід розчинити в 20 мл теплої води і ввести в черевну порожнину. Сон настає через 15-20 хв.
Під час операцій на поросятах (накладання хронічних фістул на жовчний міхур і дванадцятипалу кишку) застосовують комбінований наркоз з алкоголю та інгаляцію сумішшю ефіру з хлороформом.
Прилади, інструменти і розчини, що використовують
у фізіологічних експериментах
Для вивчення такого фізіологічного процесу, як подразнення, що відбувається в м'язах і нервах, застосовують індукційний струм. Електричний подразник кращий за інші тому, що навіть в разі його тривалої дії тканина не змінює своєї структури. Крім того, за природою цей подразник близький до нервових імпульсів і його можна градуювати. Джерелом струму може бути акумулятор, а зміну сили струму і частоту подразнень забезпечує індукційна котушка з електромагнітним перервником (рис. 7, де 1 — шкала, 2 — клеми вторинної котушки; 3, 4 — котушки; 5, 7 — верхня і нижня клеми котушки; 6 — електромагнітний перервник). Змінюючи відстань між вторинною та первинною котушками, можна посилити чи послабити індукційний струм, час індукційних ударів зменшується зі зближенням котушок.
Останнім часом для подразнення нервів і м'язів використовують випрямлячі, що перетворюють змінний струм на постійний. Ще кращими електростимуляторами є прилади, що дозволяють градуювати силу струму та забезпечувати різну частоту
подразнення. Для подібних ритмічних подразнень використовують також метрономи (рис. 8, де а — простий: 1 — коромисло, 2, 5 —дротики, 3, 4 — чашки з ртуттю; 6 — клема, 7 — ключ; 8 — вимикач; б — електричний: 1 — динамік; 2 — від-мітчик).
При проведенні фізіологічних дослідів з подразнення тканин (м'яза чи нерва), крім акумулятора і проводів, треба мати електроди, які використовують для подразнення тканин імпульсним або змінним струмом. їх виготовляють з міді, срібла, платини, нікелю, нержавіючої сталі. Найкращі електроди ті, що не окислюються і не викликають додаткових подразнень. Електроди бувають стимулюючі й відвідні. За формою вони можуть бути різними (рис. 9, а-в). На практичних заняттях можна користуватися стимулюючими електродами з мідного дроту діаметром 0,2-0,5 мм. Електроди ізольовано і нерухомо фіксують в ебонітовій,
корковій, гумовій чи дерев'яній пластинці. Для зручності одні кінці проводів загинають, а інші — фіксують клемами або припаюють до проводів.
При постійному струмі для запобігання явищам поляризації застосовують неполяризуючі електроди, які завжди виготовляють перед початком досліду (рис. 9, г). Вони складаються з двох скляних трубочок довжиною 3-4 смдіаметром 3 мм І, насиченого розчину сульфату цинку 3, цинкової емальгованої пластинки 4, яку виготовлюють, занурюючи цинкову пластинку на кілька хвилин в 10 %-й розчин сірчаної кислоти, а потім ртуть, каоліну 2, замішаного на розчині Рінгера або 0,6 %-му розчині NaCl, яким закривають кінці скляної трубочки. В деяких випадках пробку роблять з гіпсу, в який вставляють м'яку волосяну щіточку. Пробки також можна виготовити з желатину або агар-агару, використовуючи при цьому фізіологічний розчин.
|
|
Різні фізіологічні показники часто реєструються спеціальними приладами із записувальними пристроями. Найчастіше механічні рухи записують на кімографі (рис. 10, який складається з барабана 5, насадженого на вісь 3, що обертається за допомогою годинникового механізму, який заводиться ключем, надітим на штифт 6). Під барабаном на осі знаходиться диск 4, який приводиться в рух валиком осі 3 годинникового механізму. Швидкість руху барабана залежить від розміщення валика на осі, чим він ближче до центра, тим барабан рухається швидше, а чим ближче до периферії — тим по-
вільніше. Швидкість руху барабана можна змінювати регулятором обертів, насадки-флюге-ра 2, які можуть бути різного розміру. Якщо регулятор обертів зняти, то барабан кімографа рухатиметься з максимальною швидкістю. При тривалому записі рухових функцій використовують кімографи з додатковими циліндрами на штативі видовжувача або стрічкопро-тяжні механізми (рис. 11, які складаються з підставки і; борта 2; ебонітового валика 3; електромотора 4; приймальної та подавальної котушок для паперової стрічки 5, 6; столика 7; штатива
очеревину — безперервним, м'язи й шкіру — переривчастим швами.
Шви знімають через 8 діб. Через 14 діб півдослідну тварину з ізольованим відрізком кишечника за методом Тірі-Велла використовують для вивчення секреторно-екскреторних процесів всмоктування й моторики кишечника.