Методы и техника микроскопии

2.1. Устройство микроскопа (заполните таблицу)

№ п/п Части микроскопа Описание, основная функция
Оптическая часть
1. Объектив Представляет собой сложную оптическую систему, образующую увеличенное изображение объекта. Объектив состоит из металлического цилиндра с вмонтированными в него линзами, число которых может быть различным. Увеличение объектива обозначено на нем цифрами.
2. Окуляр Состоит из 2-3 линз, вмонтированных в металлический цилиндр. Между линзами расположена постоянная диафрагма, определяющая границы поля зрения. Нижняя линза фокусирует изображение объекта, построенное объективом в плоскости диафрагмы, а верхняя служит непосредственно для наблюдения. Увеличение окуляров обозначено на них цифрами: х7, х10, х15.
3. Осветительная часть Состоит из зеркала или электроосветителя, конденсора с ирисовой диафрагмой и светофильтром, расположенных под предметным столиком. Они предназначены для освещения объекта пучком света. Электроосветитель устанавливается под конденсором в гнездо подставки.
4. Конденсор Состоит из 2-3 линз, вставленных в металлический цилиндр. При подъеме или опускании его с помощью специального винта соответственно конденсируется или рассеивается свет, падающий от зеркала на объект.
5. Ирисовая диафрагма Расположена между зеркалом и конденсором. Она служит для изменения диаметра светового потока, направляемого зеркалом через конденсор на объект, в соответствии с диаметром фронтальной линзы объектива и состоит из тонких металлических пластинок. С помощью рычажка их можно то соединить, полностью закрывая нижнюю линзу конденсора, то развести, увеличивая поток света.
Механическая часть
6. Штатив Конструктивный несущий узел светового микроскопа, служащий для установки тубуса, предметного столика, осветительной системы.
7. Колонка с микро- и макровинтами Колонка имеет форму дуги. К штативу примыкает коробка механизмов, система зубчатых колес для регуляции движения тубуса. Система приводится в действие вращением макрометрического и микрометрического винтов. Макрометрический винт (кремальера, зубчатка, макровинт) служит для предварительной ориентировочной установки изображения рассматриваемого объекта на фокус. Микрометрический винт (микровинт) используется для последующей, более четкой установки на фокус.
8. Тубус Это цилиндр, в который сверху вставляют окуляры. Тубус подвижно соединен с головкой тубусодержателя, фиксируется стопорным винтом в определенном положении. Ослабив стопорный винт, тубус можно снять.

 

 

2.2. Устройство санного микротома (заполните таблицу)

№ п/п Части микротома Описание, основная функция
1. Станина Представляет собой массивную устойчивую основу аппарата. В верхней части имеется паз для перемещения ножевых салазок, несущих ножедержатель. На боковой поверхности расположены наклонные направляющие для перемещения салазок с механизмом подъема.
2. Микрометрический винт Микрометрическая установка служит для автоматической подачи объекта к ножу с целью получения срезов необходимой толщины. Главной составной частью ее является микрометрический винт, т.е. винт с очень тонкой нарезкой.
3. Объектные салазки с объектодержателем Винтовой зажим, вмонтированный в шаровую оправу каретки подачи объектодержателя. Шарнирный механизм позволяет придавать блоку любое нужное положение. Фиксацию объектодержателя производят специальной рукояткой.
4. Ножевые салазки с зажимом для ножа Массивные устойчивые салазки, снабженные ручкой для передвижения и несущие на себе ножедержатель, который укрепляют на салазках специальной рукояткой, позволяющей менять горизонтальный угол расположения ножа. Сам же зажим снабжен подвижной цилиндрической втулкой, перемещение которой с помощью рычажка меняет угол наклона ножа.
5. Микротомные ножи Резку исследуемого объекта на микротоме производят с помощью специальных микротомных ножей. Существует несколько разновидностей микротомных ножей. В основу их классификации положена форма лезвия. Режущий край микротомного ножа в отличие от обычной бритвы имеет так называемый фасеточный шлиф, т. е. угол сечения лезвия, образующийся в результате заточки лезвия под некоторым углом относительно его поверхности.

 

 

2.3. Методы микроскопии (заполните таблицу)

№ п/п Виды микроскопии Разновидности Цели использования
1. Световая микроскопия Витальная (прижизненная) микроскопия Показывает, что многие структуры живой клетки сравнительно мало изменяются при умелой фиксации и последующем окрашивании. Витальная микроскопия возможна и без окрашивания, если в обычный микроскоп ввести так называемый темнопольный конденсор. Он освещает объект так, что в глаз наблюдателя попадают только те лучи, которые рассеялись на частицах объекта и тем самым изменили направление своего распространения. Лучи, прошедшие через фон без рассеяния, в глаз не попадают. Поэтому частицы объекта светятся и ярко выделяются на темном фоне (темном поле). Частицы объекта хорошо видны, даже если их размеры меньше разрешаемого расстояния.
Темнопольная микроскопия Обеспечивает наибольший возможный контраст изображения. успешно применялась для изучения спирохет, лептоспир и других слабо окрашиваемых микроорганизмов. При работе с гистологическими препаратами она неприменима.
Ультрамикроскопия Мельчайшие изучаемые частицы освещаются мощным боковым пучком света и видны точками на черном фоне. Ультрамикроскопия позволяет подсчитывать частицы, оценивать их размеры и другие свойства. Применяется для изучения коллоидных растворов, аэрозолей, суспензий.
Ультрафиолетовая микроскопия Основана на способности некоторых веществ избирательно поглощать ультрафиолетовые лучи с определенной длиной волны. Это позволяет наглядно демонстрировать и изучать, в том числе количественно, распределение веществ в живых клетках или фиксированных препаратах. В ультрафиолетовом микроскопе участок, содержащий нуклеиновую кислоту, выглядит значительно темнее.
Люминесцентная микроскопия живой объект обрабатывают специальными красителями, которые, будучи освещены синим, фиолетовым или ультрафиолетовым светом, начинают светиться, излучая более длинные волны (зеленые, желтые). Цвет возбужденного вторичного свечения зависит от химических свойств объекта и введенного в него красителя.
Поляризационная микроскопия Основана на изменении плоскости колебаний световой волны после прохождения через кристаллы. В практической медицине не применяется.
2. Электронная микроскопия Трансмиссионная и сканирующая электронная микроскопия Это система визуализации изображения, которая теоретически обеспечивает очень высокое разрешение (0,1 нм). Основана на взаимодействии между электронами и компонентами тканей. Тонкопленочный объект просвечивается пучком ускоренных электронов
Растровая (сканирующая) микроскопия. Предназначен для получения изображения поверхности объекта с высоким (до 0,4 нанометра) пространственным разрешением, также информации о составе, строении и некоторых других свойствах приповерхностных слоёв. Основан на принципе взаимодействия электронного пучка с исследуемым объектом.Их главная функция — получение увеличенного изображения исследуемого образца и/или изображений образца в различных регистрируемых сигналах. Сопоставление изображений, полученных в разных сигналах, позволяют делать вывод о морфологии и составе поверхности.

 

2.4. Определите суть следующих основных понятий

1. Разрешающая способность микроскопа – характеризует их способность давать раздельные изображения двух близко расположенных точек. Из-за дифракции света изображение точки представляет собой не строго точку, а кружок (светлое пятно, окруженное кольцами). Наименьшее угловое или линейное расстояние между двумя точками, при котором система дает их раздельное изображение, называется пределом разрешения и характеризует границы применимости геометрической оптики.

2. Увеличение микроскопа – определяется как произведение увеличения объектива на увеличение окуляра.

 


Понравилась статья? Добавь ее в закладку (CTRL+D) и не забудь поделиться с друзьями:  




Подборка статей по вашей теме: