Основные принципы диагностики иммунопатологических состояний

Иммунодиагностика – это решение двух вопросов:

1. Изменена ли иммунологическая реактивность организма?

2. Если она изменена, в чем выражено это изменение и в какой степени?

Иммунологическая реактивность – это состояние защитных сил организма и его способность противостоять неблагоприятным факторам окружающей среды (это очень сложное понятие, включающее как неспецифическую резистентность, так и специфические иммунные реакции).

Методы исследования иммунологической реактивности.

При исследовании состояния иммунологической реактивности проводится:

* оценка уровня естественной резистентности;

* оценка уровня иммунного статуса.

Оценка уровня естественной резистентности.

I. Исследование клеточных факторов неспецифической резистентности.

1. Определение бактерицидной активности кожи осуществляется путем посевов-отпечатковс поверхности кожи и затем рассчитывается индекс бактерицидности по формуле:

ИБ= К₀ – К₂₀  х100,

        К₀

где ИБ – индекс бактерицидности (в %), в норме ИБ составляет более 95%.

К₀ – количество колоний сразу после контаминации кожи.

  К₂₀ – количество колоний через 20 минут.

2. Определение фагоцитарной активности лейкоцитов.

§ Фагоцитарный индекс (фагоцитарная активность) – процент лейкоцитов, участвующих в фагоцитозе (N=79%).

§ Фагоцитарный число (фагоцитарный индекс) – среднее количество частиц, поглощенных одним фагоцитом (N=1,3-3,0, для частиц латекса=10,2).

§ Завершенность фагоцитоза – процент частиц, переваренных за определенное время одним фагоцитом.

§ НСТ-тест – способность фагоцитирующих клеток восстанавливать бесцветный реактив нитросиний тетразоль в краситель, окрашивающий их в синий цвет (N=48-80%).

§ Опсоно-фагоцитарный индекс – отношение ФИ иммунной сыворотки (сыворотки, содержащей опсонины) к ФИ нормальной (неиммунной) сыворотки.

II. Исследование гуморальных факторов неспецифической резистентности:

§ уровень комплемента в сыворотке крови (по 50 или 100% гемолизу эритроцитов барана);

§ содержание лизоцима в слюне или сыворотке крови (по способности лизировать культуру Micrococcus lisodeictikus);

§ титры сывороточных β-лизинов (по способности лизировать культуру Bacillus subtilis);

§ С-реактивный белок в сыворотке крови (в реакции преципитации);

§ сывороточный интерферон (в реакции нейтрализации).

Оценка иммунного статуса.

I. Исследование Т-системы иммунитета.

1. Количественное определение Т-лимфоцитов:

§ в реакции розеткообразования с бараньими эритроцитами (ЕРОК) (устаревший метод) – розеткой считается лимфоцит, прикрепивший не менее 3 эритроцитов (N=50-76%);

§ по кластерам дифференцировки CD-2 (неиммунный Т-лимфоцит), CD-3 (зрелый Т-лимфоцит),   CD4 (Т-хелперы) и CD8 (цитотоксические Т-лимфоциты) с диагностическими меченными моноклональными антителами в непрямых вариантах РИФ и ИФА (N CD4=31-46%, CD8+=30-35%, соотношение CD4/CD8=1,0: 2,2-1,0: 1,5).

2. Функциональная активность Т-лимфоцитов:

§ реакция бластной трансформации (РБТ) – способность Т-лимфоцитов под воздействием фитогемагглютинина (ФГА) превращаться в большие бластоподобные клетки с большим рыхлым ядром (N=20-100%);

§ цитотоксическая функция Т-клеток в реакциях с клетками-мишенями;

§ реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) под влиянием соответствующих антигенов.