Экспресс-диагностика туляремии

Возбудитель туляремии (Туляре – район Калифорнии) – Franciella tularensis относится к роду с невыясненным положением в систематике микробов. Этиологическая природа туляремии была установлена в 1912 году Г.Мак-коем и Ш.Чепиным, а далее подробно изучена Э.Франсисом.

Туляремия – тяжелая кровяная зоонозная инфекция с природной очаговостью. Основные источники инфекции – водяные крысы, ондатры, зайцы, крысы, мыши. Больной человек неконтагиозен и для возбудителя является биологическим тупиком. Передается трансмиссивным путем через клещей,  а нередко и контактным, алиментарным или аспирационным путем.

Возбудитель содержит нуклеопротеидный О- и оболочечный белково-липидный Vi-антиген. У перенесших болезнь вырабатывается очень напряженный и длительный иммунитет.

Материал для исследования: кровь, гной, пунктат бубона, слизь из зева.

Реакция агглютинации-рассеивания. Предложена простая, быстрая, высокочувствительная и специфичная реакция агглютинации-рассеивания, для по­становки которой используется антительный диагностикум. Это суспензия темно-коричневого цвета, представляющая собой комплексное соединение шаровидных крупнодисперсных НК-частиц (Никитин и Котич) и противотуляремийных иммуноглобулинов. Препарат хранят в холодильнике при +4°С в течение 2—3 лет. По истечении 3 лет препарат можно ресенсибилизировать, так как НК-частицы высокостабильны.

Для постановки реакции агглютинации-рассеивания на тщательно обезжиренное предметное стекло наносят слева каплю исследуемого материала (опыт), справа — каплю физиологического раствора или гетерологичного микроба (контроль). Затем к каплям добавляют по одной капле НК-антительного туляремийного диагностикума. Переме­шивание капель производят путем вращательного движе­ния предметного стекла по часовой стрелке и через 1— 5 мин оценивают результаты реакции.

Учет и оценка результатов производятся невооружен­ным глазом, а также с помощью лупы и микроскопа в те­чение 1—5 мин. При положительной реакции в случае на­личия туляремийного микроба или его антигена в иссле­дуемом материале в небольших количествах (до 1—3 млн по стандарту ГКИ) отмечается феномен рассеивания шаро­видных НК-частиц по всей площади капли, что регистриру­ется под малым увеличением микроскопа, а при концентра­ции 3—5 млн и более — феномен образования темно-ко­ричневых зерен агглютината, видимых невооруженным гла­зом. При отрицательной реакции формируется четко очер­ченное, темно-коричневое пятно или точка в центре капли.

Предлагаемая реакция с использованием туляремийно­го НК-диагностикума предназначена для быстрого выяв­ления специфического антигена при исследовании объек­тов внешней среды, пищевых продуктов, трупов павших грызунов, а также в тех случаях, когда из-за массивного пророста посторонней микрофлоры или гибели микроба выделение  его посевом или через биологическую пробу не удается. Реакция строго специфична и позволяет обнару­живать туляремийный микроб в небольших количествах (300 тыс. — 1 млн. м.к./мл) или его антиген.

А также ТИФМ и др.