А) Исследование нативного препарата

Материал помещают в каплю тёплого раствора хлорида натрия на предметном стекле, тщательно перемешивают и накрывают покровным стеклом. Изучают под микроскопом в тёмно поле зрения с объективом 40.

Использование раствора Рингер-Локка позволяет не подогревать его и нет надобности в немедленном просмотре. Трихомонады сохраняют свою подвижность в нём до 96 часов. При этом чётко видны особенности морфологии и движения трихомонад. Характерны овальная или округлая форма. По величине они несколько больше лейкоцитов, но меньше эпителиальных клеток. Движения толчкообразные.

В нативном препарате за влагалищную трихомонаду иногда принимают из семейства жгутиковых – бодонидов. В отличие от трихомонад они имеют два жгутика и быстро двигаются по прямой. Иногда хорошо подвижные бактерии прикрепляясь к лейкоцитам, создают впечатление большого количества подвижных трихомонад.

Б) Исследование окрашенных препаратов.

Материал распределяют в виде тонкого мазка, подсушивают на воздухе и фиксируют.

Методы окраски:

· Метиленовым синим (1% водный раствор 1 минуту) – трихомонады имеют округлую, овальную, полигональную форму, расположены в слизи, между клеточными элементами; ядро трихомонады окрашивается в синий цвет, вакуолизированная цитоплазма в светло-синий, вакуоли бесцветны.

· По Граму – трихомонады окрашиваются бледно: оболочка в виде тонкой полоски окружает сетчатую цитоплазму оранжево-красного цвета, ядро сиреневого или фиолетового цвета, жгутики и ундулирующая мембрана не просматриваются.

· По Цогикян – обнаруживаются 4 жгутика и аксоль, цитоплазма пенистая, розовая, ядро розовато-фиолетовое.

Окраска по Романовскому дает лучшие результаты в модификации Н. А. Цагикян (1954). Для этого фиксированный тонкий мазок красят 40 мин краской следующего состава: воды дистиллированной 100 мл, 1 % раствора карбоната натрия 15 капель и краски Романовского 4 мл. По указанной модификации более четко красятся жгутики, трихомонады становятся хорошо различимыми. Ядра окрашиваются в фиолетово-рубиновый или фиолетовый цвет, цитоплазмав голубой, жгутики и некоторые другие структурные образования в розово--красный.

· По Романовскому-Гимзе (1 час 5%водный раствор Азур-Эозин) – трихомонады имеют грушевидную, овальную, круглую или неправильную форму, с хорошо выраженными контурами клетки; ядро овальное, круглое, в форме сливовой косточки или лисьего глаза, окрашено в фиолетовый цвет; цитоплазма ячеистая, пенистая, вакуолизированная, окрашена в синий или голубовато-серый цвет.

· По Лейшману-Романовскому (краску Лейшмана наносят на нефиксированный мазок на 20-30 секунд, промывают водой и докрашивают по Романовскому-Гимзе в течение 1 часа после промывают водой).

Окрашенные препараты изучают при большом увеличении с иммерсионной системой.

В последнее время используют фазово-контрастную и люминесцентную микроскопию.

Культуральное исследование.

Фотогалерея