Питательные среды. Таблица 78 - Антигенная структура видов рода Bordetella

Таблица 78 - Антигенная структура видов рода Bordetella

Таблица 73 - Дифференциация видов рода Bordetella, патогенных для животных

И сходных с ним по морфологическим свойствам родов

Таблица 77 - Дифференциальные признаки бактерий рода Bordetella

Признаки	Роды
Bordetella	Brucella	Haemophilus	Alcaligenes
Строгие паразиты	+	+	+	-
Сапрофиты	-	-	-	+
Строгие аэробы	+	+	-	+
Потребность в ростовых факторах: тиамине	-	+	-	-
никотинамиде	+	-	-	-
X(или V)	-	-	+	-
Ферментация углеводов	-	-	+	-
Редукция нитратов	Р	+	+	Р
Подщелачивание лакмусового молока	+	-	-	+
Окисление аминокислот	+	+	-	+
Редукция тетразолия	+	н.д.	+	-
Рост в присутствии 320 мг/л теллурита калия	-	н.д.	-	+
Утилизация цитратов	Р	-	-	+

н.д. — нет данных; Р — признак различен в таксонах рангов (виды рода).

Идентификация бордетелл на уровне вида. С целью дифференциации видов внутри рода Bordetella исследуют под­вижность клеток изолированной культуры, наличие гемолитической актив­ности, способность к росту на агаре Мак-Конки, скорость роста на среде Борде-Жангу, продукцию бурого пигмента на пептонном агаре, морфо­логию колоний на SB-среде, редукцию нитратов, образование уреазы, оксидазы, утилизацию цитрата. При наличии системы API можно дополнительно определить использование в качестве единственного источ­ника углерода ацетата, адипината, мезо-татрата, итаноната, сукцината. В. hronchiseptica способна утилизировать перечисленные субстраты, В.avium не использует мезо-татрат и итанонат.

Серологическая идентификация бордетелл. При наличии бордетеллезных агглютинирующих сывороток медицинс­кого назначения можно провести серологическую идентификацию В. hronchiseptica и
В. parapertussis.

Серологическая идентификация может быть осуществлена на этапе просмотра первичных посевов. При обнаружении подозрительных колоний из них делают мазки, окрашивают по Граму. Если клетки соответствуют

Признаки	Виды бордетелл
B.bronchiseptica	B.avium	B.parapertussis
Подвижность	+	+	-
β-гемолиз	+ 1)	-	-
Появление колоний на среде Борде-Жангу (дни)	1-2	1-2	2-3
Продукция бурого пигмента при росте на пептонном агаре	-	D	+
Морфология колоний на SB-среде	мелкие, голубые	мелкие, голубые	н.д.
Редукция нитратов	+	-	-
Уреаза	+	-	+
Оксидаза	+	+ 2)	-
Использование в качестве ис­точника углерода цитрата	+	+	+
Рост на агаре Мак-Конки	+	+	+

Антигены	Виды бордетелл
В.bronchiseptica	B.parapertussis	В.pertussis
К-антигены общий для рода фактор 7	+	+	+
Специфические для рода факторы: 1	-	-	+
	_ -	-_	+
	+	-	-
Встречающиеся у отдель­ных штаммов факторы: 2,3,4,5,6, 13			+
8,9, 10		+
8,9, 10, 11, 13	+
О-антиген, общий для ро­да	+	+	+

морфологическим и тинкториальным характеристикам бордетелл, то культуры проверяют в РА на стекле с родовой бордетеллезной сыво­роткой. В составе клеток бордетелл установлено наличие 14 антиге­нов (факторов). Родовым антигеном является фактор 7, который встре­чается у всех бордетелл. Видовыми факторами для В. bronchiseptica является антиген 12, для В. parapertussis — 14. Типовыми факторами для В. bronchiseptica определены 8, 9, 10, 11, 13, для В. parapertussis — 8, 9, 10. Реакцию агглютинации на стекле ставят с адсорбированными видовыми факторными сыворотками, используя 48-часовые культуры Используя иные факторные сыворотки, можно определить серотип.

Биопроба. Для подтверждения патогенности выделенных культур бордетелл у них определяют наличие токсигенных и адгезивных свойств.
В. bronchiseptica и В. avium синтезируют иммунологически не тождествен­ные дермонекротические токсины, которые выявляют внутрикожной инъекцией на морских свинках. При введении молодых культур возбу­дителей внутрибрюшинно можно наблюдать летальный эффект. С це­лью обнаружения адгезинов В.bronchiseptica бактериальную массу из двух колоний суточной культуры суспендируют на предметном стекле в капле физиологического раствора и добавляют равный объем 3%-ной взвеси отмытых эритроцитов барана. В положительных случаях агглютинация наступает через 1-2 минуты. В качестве контролей используют суспензию бактерий без эритроцитов и суспензию эритроци­тов без бактерий.

Селективная среда Smith-Baskerville (SB-среда)

Основную питательную среду, состоящую из 870 мл дистиллированной Воды, 20 г пептона, 5 г натрия хлорида, 15 г агара, автоклавируют при И 21° С в течение 15 минут, охлаждают до 55° С и вносят добавки.

Антимикробная добавка: гентамицин — 0,5 мкг/мл, пенициллин — 20 мкг/мл, фурантадон —20 мкг/мл. Углеводная добавка: 10%-ный раствор (стерильной глюкозы —100 мл, 10%-ный раствор лактозы —100 мл.

Индикатор: бромтимоловый синий 0,2%-ный раствор — 40 мл. Инди­катор готовят, добавляя к 475 мл дистиллированной воды 250 мл 0,1N ед­кого натрия и 1,0 г бромтимолового синего.

Компоненты перемешивают и готовую среду разливают в чашки Петри.

Кровяной агар с селективными добавками. К базовой питательной среде добавляют клиндамицин до конечной концентрации 2 мкг/мл и неомицин — 4 мкг/мл.

Лабораторная диагностика инфекционного кератоконъюктивита
крупного рогатого скота

Моракселлы являются грамотрицательными аэробными бактериями, отно­сятся к роду Moraxella, обитают на слизистых конъюнктивы и носоглотки клинически здоровых животных. Основной патогенный вид рода — М. bovis, вызывает инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота, его также выделяют при конъюнктивитах лошадей. Болезнь возни­кает на фоне предрасполагающих факторов, преимущественно у молодых животных до двухлетнего возраста. В этиологии болезни в качестве основ­ного предрасполагающего фактора рассматривают действие естественно­го (солнечного) ультрафиолетового излучения.