Бактериологическое исследование
Лабораторная диагностика неориккетсиоза собак
Серологическая диагностика
Биопроба. Инфекция, вызываемая E.phagocytophila воспроизводится введением дефибринированной крови, взятой в период лихорадки, крупному рогатому скоту, овцам. Инкубационный период составляет 4-8 дней. Эрлихиоз собак воспроизводится заражением животных кровью, возможно культивирование возбудителя в культуре моноцитов собак. При заражении кровью молодых лошадей клинические признаки инфекции E.equi воспроизводятся не всегда.
Выделение и идентификация культуры возбудителя
Для изоляции возбудителей используют перевиваемые или первичные культуры клеток костного мозга и нейтрофилов крови. Идентификацию возбудителя проводят микроскопически, в РИФ, ПЦР.
Испытаны непрямой метод флуоресцирующих антител, ЭЛИЗА-тест для обнаружения антител в крови при инфекциях, вызываемых Е.canis, E.equi и другими эрлихиями. Выпускается диагностический набор для ЭЛИЗА (фирма Helica Biosystems).
|
|
Возбудитель относится к трибе Rickettsiae, роду Neorickettsia, представленному одним видом Nihelminthoeca. В настоящее время род Neorickettsia дополнен видами N. risticii и N. sennetsu. В природе этот вид риккетсий обитает в организме трематоды Nanophyetus salmonicida, а он, в свою очередь, в организме лососевых рыб. Все стадии развития трематоды (яйца, редии, церкарии, метацеркарии) инфекционны для собак. Возбудитель в искусственных питательных средах, куриных эмбрионах не культивируется. Паразитирует в ретикулоэндотелиальных клетках лимфоидной системы, включая макрофаги. Собаки, лисы заражаются при поедании рыбы, развивается лихорадка. Болезнь регистрируется в северных районах США. Лабораторная диагностика основывается на результатах микроскопического исследования материала, выявлении антител методом непрямой иммуннофлуоресценции.
Объектом исследования являются прижизненно взятые биоптаты из лимфатических узлов на стадии лихорадки. Кровь содержит возбудитель, но методом микроскопии его обнаружить трудно. Риккетсий лабильны, но при -70° С выживают до 6 месяцев.
Мазки фиксируют метанолом, окрашивают по Ромаиовскому-Гимза, Маккиавелло. Возбудитель в окрашенных препаратах имеет кокковидную форму или полиморфен (короткие палочки, кольцевидные структуры, иногда сложные колонии), локализуется в цитоплазме ретикулярных клеток лимфоидных тканей; по Ромаиовскому-Гимза окрашивается в голубой, Маккиавелло — голубой и розовый цвета. В циркулирующих лимфоцитах возбудитель не выявляется, хотя кровь инфекционна.