Количественный анализ ЛРС

Для определения количественного содержания иридоидов в ЛРС используют колориметрические, спектрофотометрические, хромато-спектрофотометрические методы, а также ВЭЖХ.

Способ 1:

Навеску (0,2 г) измельченного растительного сырья перемешивают с небольшим количеством карбоната кальция и трижды экстрагируют этанолом по 3 мин на кипящей водяной бане с обратным холодильником. Полученный экстракт фильтруют, упаривают досуха. Остаток обрабатывают петролейным эфиром. К очищенному остатку прибавляют 5-10 мл воды и раствор фильтруют через колонку (1х10 см) с нейтральным оксидом алюминия, после чего колонку промывают водой до получения 20 мл фильтрата.

1 мл полученного фильтрата смешивают с 0,5 мл реактива Трим-Хилла, 2,5 мл 50% уксусной кислоты и нагревают 15 мин при 70°С. Полученный раствор синего цвета охлаждают, перемешивают в течение 5 мин и измеряют оптическую плотность при 570 нм.

Способ 2:

0, 2 г измельченного растительного сырья смешивают с 2 мг карбоната кальция и экстрагируют 3 раза по 10 мл 50% метанола при нагревании на водяной бане с обратным холодильником. Обьединенные экстракты выпаривают досуха, остаток для удаления липофильных веществ обрабатывают петролейным эфиром. Очищенный остаток растворяют в 5-10 мл воды, полученный раствор фильтруют через колонку (2 х 1 см) с оксидом алюминия, которую затем промывают водой до получения 20 мл элюата.

К 1 мл очищенной суммы иридоидов прибавляют 0,5 мл реактива Трим-Хилла, 2,5 мл 50% водного раствора уксусной кислоты и нагревают 15 мин на водяной бане при 70°С. Полученный синий раствор охлаждают в течение 5 мин и измеряют оптическую плотность на фотоэлектроколориметре при желтом светофильтре (570 нм).

Количественное содержание иридоидов в ЛРС можно определить общепринятыми физико-химическими методами.

Тем не менее, когда исследуют чистые горечи, в первую очередь устанавливают показатель горечи.

Горечь в растительном сырье определяют путём сравнения порога концентрации горечи в экстракте из растительного сырья со стандартным раствором хинина гидрохлорида.

Порог чувствительности горечи – это наименьшая концентрация раствора, которая позволяет ощутить горечь в течение 30 с.

Показатель горечи выражается в единицах, которые эквивалентны горечи в растворе, содержащем 1 г хинина гидрохлорида в 2000 мл воды.