Окраска по Романовскому-Гимза является одним из основных методов при изучении морфологии риккетсий, хламидий, спирохет, простейших, а также при исследовании форменных элементов крови.
Техника. Краситель Романовского-Гимза состоит из азура, эозина и метиленового синего. Непосредственно перед употреблением к 10 мл дистиллированной воды нейтральной реакции прибавляют 10 капель краски и тотчас же наливают на препарат, предварительно фиксированный жидким фиксатором, на один час. Затем краску сливают, препарат промывают водой, высушивают на воздухе и микроскопируют. Окрашивание происходит быстрее (30-40 минут), если препарат с краской поместить в термостат при 37°С. К 10 мл дистиллированной воды нейтральной или слабо щелочной реакции непосредственно перед окраской препарата прибавляют 10 капель краски и тот час же наливают на фиксированный препарат (или погружают препарат в стаканчик с краской). Через 1 час краску сливают, препарат промывают водой, высушивают на воздухе и исследуют. Если поместить препарат с краской в термостат при 37º, то окрашивание происходит быстрее (30-40 минут).
Результаты окрашивания зависят от свойства воды, поэтому следует проверять ее реакцию.
Микроскопическая картина. Риккетсии окрашиваются в розово-красный цвет, ядра эукариотических клеток – в красно-фиолетовый, а цитоплазма – в голубой.
Метод Здродовского
Техника. Препарат тонким слоем наносят на стекло, фиксируют на пламени и окрашивают разведенным карболовым фуксином (10-15 капель фуксина на 10 мл дважды дистиллированной воды) в течение 5 минут; затем препарат слегка обесцвечивают погружением на 1-3 секунды в слабую (0,01%) соляную кислоту, промывают водой и докрашивают в течение 30 секунд 1% раствором водного метиленового синего. Тонкий мазок фиксируют на пламени горелки. Окраску производят разведенным карболовым фуксином (10-15 капель фуксина на 10 мл дистиллированной воды) в течение 5 минут. Окрашенный препарат промывают водой, а затем обесцвечивают в растворе органической или минеральной кислоты (0,5% лимонная кислота, 0,01% соляная кислота) в течение 2-3 секунд. Затем препарат промывают водой и докрашивают 0,5% раствором метиленовой синьки в течение 0,5 минуты.
Микроскопическая картина. Риккетсии окрашиваются в рубиново-красный цвет, в то время как клетки хозяина обесцвечиваются кислотой и дополнительно окрашиваются в голубой (протоплазма) или синий (ядра) цвет (рис.20).
Окраска хламидий