Обнаружение капсул у бактерий

Некоторые микробы обладают способностью откладывать на поверхности своего тела мощный слизистый слой вокруг клеточной стенки, его называют капсулой. В состав капсул входят, главным образом, полисахариды (пневмококк), но у некоторых они содержат и полипептиды (сибиреязвенная палочка). Капсулы имеют консистенцию геля, поэтому при микроскопии живых бактерий они видны очень плохо. Для их обнаружения применяют негативную окраску. Все перечисленные методы относятся к позитивным, т.к. при их использовании окрашиваются микробные клетки. При негативных способах краситель заполняет пространство вокруг бактерий, в результате чего они выглядят светлыми частицами на темном фоне.

Обнаружение капсул по методу Бурри

Методика:

1) смешать на предметном стекле немного капсульной культуры и каплю разведенной (1:9) туши; приготовить тонкий мазок;

2) высушить на воздухе и бактериоскопировать.

На темном фоне хорошо видны бесцветные капсулы.

Модификация по Бурри - Гинсу включает создание фона краской конгорот, последующую фиксацию в 5% растворе НС1 и дополнительную окраску водным фуксином. В результате - общий фон темного цвета, капсулы - бесцветные, а тела бактерий - красные.

Окраска по Романовскому - Гимзе

Относится к сложным методам и применяется чаще всего для мазков-отпечатков из органов или мазков крови после фиксации в жидком фиксаторе. Позволяет выявить ядерные элементы бактериальных клеток и гранулы волютина. Для окраски берут каплю готовой краски на 1 мл воды, которая должна быть подщелочена до рН 7,2.

Методика:

1) поместить препарат (мазком вниз) в чашку Петри, подложив под края стекла спички или кусочки предметных стекол;

2) подлить краску сбоку так, чтобы она без пузырей подтекла под мазок (красить 1-24 ч);

3) промыть водой (рН 7,2) и высушить.

Протоплазма молодых клеток окрашивается в сине-фиолетовый цвет, ядерные элементы - в красно-фиолетовый.

ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ