Задача 1. При электрофорезе на бумаге белков сыворотки крови больного Р.С. получили следующие результаты: альбумины-48,5%, α1-глобулины-12,6%, α2-глобулины-7,3%, β-глобулины-14,8%, γ-глобулины-16,8%. Выделите изменения, обнаруженные в белковом спектре крови больного и рассчитайте величину белкового коэффициента, если общее содержание белка в крови у данного больного составляло 62 г/л.
Задача 2. Необходимо разделить смесь белков, содержащую церрулоплазмин (Mr151000, ИЭТ 4,4), β-лактоглобуллин (молекулярная масса 150000, ИЭТ 6,3) и γ-глобулин (молекулярная масса 37100, ИЭТ 5,2). Предложите методы разделения смеси этих белков. В какой последовательности будут выделяться эти белки из смеси?
Эталоны ответов к заданиям
1. -1); 2. -2);
3. –2)(аминокислота, имеющая наибольший отрицательный заряд прочнее удерживается положительно заряженными частицами смолы);
4. -3);5. –1).6.–4);7. –4); 8. -4) (детергент устраняет влияние заряда белка и разделение полностью определяется размером белковых молекул).
Эталоны ответов на задачи
Задача 1. Снизилось процентное содержание альбуминов (в норме альбумины составляют 55,4-78,9%), повысилось содержание α1- и β-глобулинов. Соотношение количества альбуминов к количеству глобулинов в биологических жидкостях. В крови величина альбумины-глобулины в норме относительно постоянна и равна 1,5—2,3. Белковый коэффициент в данном случае снижен и составляет 0,93. Альбуминов в сыворотке крови больного содержится 30 г/л, глобулинов – 32 г/л.
Задача 2. Для отделения β-лактоглобулина, значительно отличающегося по величине молекулярной массы, можно использовать метод гель-фильтрации. Для разделения церрулоплазмина и γ-глобулина, имеющих различные значения ИЭТ, целесообразно использовать электрофорез.
Раздел 2. Ферменты