Хемилюминесценция сопровождает некоторые экзергонические химические реакции. В организме – реакция рекомбинации перекисных липидных радикалов:
*RO2 + *RO2 → продукты* → продукты + hv.
Плюсы: метод очень чувствителен (до 10-14 моль свободных радикалов).
Минусы: определяются радикалы только одного типа.
Спектроскопия магнитного резонанса:
1. ЭПР – электронный парамагнитный резонанс
2. ЯМР – ядерный магнитный резонанс
В основе методов лежит расщепление энергетических уровней частиц в постоянном магнитном поле. Причина во взаимодействии с полем магнитных моментов неспаренных электронов (ЭПР) и ядер (ЯМР). Спектры ЯМР можно получить в разных классах магнетиков. А необходимым условием ЭПР является парамагнетизм, что характерно для свободных радикалов.
В отсутствии поля магнитные моменты отдельных частиц ориентированы хаотически. В магнитном поле они могут быть сориентированы двумя способами. Их магнитные моменты могут быть направлены по полю и против поля. В первом случае энергия частицы меньше по сравнению с хаотическим расположением векторов; а во втором случае – больше. Большинство частиц окажется расположенными по полю.
|
|
В результате образуется дополнительная система подуровней. Разность энергий подуровней соответствует величине квантов СВЧ-диапазона.
Е2
hv
единый
энергетический Е1
уровень
Рm – магнитный момент частицы
Н – вектор напряжённости магнитного поля
Большая часть частиц сориентированы по полю, т.е. находятся на нижнем уровне. При дополнительном воздействии электромагнитным излучением СВЧ-диапазона произойдёт поглощение квантов излучения с энергией hv = E2 – E1. В системе произойдёт переход с нижнего уровня на верхний. Этот переход регистрируется как сигнал магнитного резонанса.
Зарегистрирован будет спектр магнитного резонанса – графическая зависимость от длины волны: