Выявить наличие спор в фиксированном препарате из 3-х суточной культуры спорообразующих бактерий Bacillus anthracoides (окраска по Ожешко). Препарат микроскопировать с объективом 90´ и иммерсией. Обратить внимание на расположение спор, характер их окраски, диаметр спор по отношению к диаметру бактериальной клетки. Определить форму и расположение клеток. Препарат зарисовать, внести методику окраски по Ожешко в протокол.
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Окраска по Ожешко
1. Приготовить толстый и равномерный мазок, без скоплений клеток на краю стекла.
2. Нанести на мазок несколько капель 0,5%-ного раствора соляной кислоты и подогреть 1-2 мин над пламенем горелки до закипания.
3. Слить кислоту, препарат промыть водой.
4. Высушить мазок на воздухе.
5. Зафиксировать жаром.
6. Окрасить мазок карболовым фуксином Циля с подогреванием до появления паров, но не доводя краситель до кипения, красить 3-5 мин.
7. Слить краситель и промывать препарат водой.
8. Погрузить препарат на 3-5 с в 5%-ный раствор серной кислоты.
|
|
9. Обильно промыть препарат водой.
10. Докрасить препарат метиленовым синим Леффлера в течение 3-5 мин.
11. Высушить препарат на воздухе.
З а д а н и е №2
Выявить наличие капсулы в фиксированном препарате из суточной культуры капсульных бактерий Klebsiella pneumoniaе (окраска по Бурри-Гинсу). Препарат микроскопировать с объективом 90´ и иммерсией. Обратить внимание на бесцветную капсулу бактериальных клеток (определить морфологию). Препарат зарисовать, внести методику окраски по Бурри-Гинсу в протокол.
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Окраска по Бурри-Гинсу
1. На предметное стекло налить каплю разведенной (1:9) черной туши.
2. Поместить в каплю туши исследуемую суспензию бактерий и перемешать.
3. Нанести на мазок каплю смеси Никифорова на 2-3 мин (фиксация).
4. Промыть препарат водой.
5. Окрасить фуксином Циля, разведенным 1:3, в течение 3-5 мин.
6. Промыть препарат водой и высушить
7. Докрасить препарат метиленовым синим Леффлера в течение 3-5 мин.
8. Высушить препарат на воздухе.
З а д а н и е №3
Выявить наличие внутриклеточных включений (зерна волютина) в фиксированном препарате из суточной культуры возбудителя дифтерии – Corynebacterium diphtheriae (окраска по Леффлеру). Препарат микроскопировать с объективом 90´ и иммерсией. Определить форму и взаимное расположение бактерий, количество зерен волютина. Препарат зарисовать, внести методику окраски по Леффлеру в протокол.