Элективная среда с генцианвиолетом и малахитовой зеленью

Приготовление растворов красок. 0,1 ткаждого красителя растирают от­дельно в ступке, прибавляя постепенно 20 мл этилового спирта. После полного растворения к краске добавляют 80 мл дистиллированной воды. Полученные 0,1%-ные растворы хранят в плотно закупоренных флаконах в темном месте. Срок хранения 3 месяца.

Прuготовленuе среды. На 100 мл расплавленного и охлажденного до 50⁰С МППА (или МПА) с глюкозой и глицеринам, рН 6,8-7,0, асептически добавляют по 0,5 мл растворов красок, перемешивают и разливают в чашки. Конечная концентрация красителей 1: 200 000.

Элективная среда Кроля. На каждые 100 мл расплавленного и охлажденно­го до 50⁰С печеночного агара Хеддлсона добавляют 0,5 мл 0,1%-ного раствора генцианвиолета (см. предыдущую пропись), перемешивают и разливают в чашки.

Плотные среды с фуксином и тиомином. 0,1%-ные растворы основного фук­сина и тионина готовят так же, как и раствор генцианвиолета (см. выше).

Среды с фуксином. Расплавляют в двух колбах по 100 мл МППА (или МПА) с глицерином и глюкозой, рН 6,8-7,0 охлаждают до 50⁰С и добавляют в одну колбу 2 мл 0,1%-ного раствора основного фуксина, а в другую - 1 мл. Содержимое колб перемешивают и разливают в маркированные чашки. Конеч­ная концентрация фуксина будет соответственно 1: 50 000 и 1: 100 000.

Среды с тионином. Расплавляют в трех колбах по 100 мл МППА (или МПА) с глицерином и глюкозой, рН 6,8-7,0. В охлажденной до 50⁰С агар вливают в первую колбу 4 мл 0,1%-ного раствора тионина, во вторую 2 и в третью 1 мл. Разлив выполняют, как указано выше. Концентрация красителя будет соответственно 1: 25000, 1: 50000 и 1: 100000.

Среда заменитель агара Альбими. Сначала готовят дрожжевую воду: 1 кг пекарских дрожжей заливают 1 л дистиллированной воды, кипятят на медлен­ном огне при помешивании до растворения дрожжей и фильтруют через полотно. Фильтрат в замеренном объеме вливают в колбу, добавляют по объему 1% хлороформа, перемешивают, плотно закрывают резиновой пробкой, обвязывают сверху бумагой и хранят в темном прохладном месте. Срок хранения не более двух недель.

Приготовление среды. На 1 л дистиллированной воды берут 20 г сухого пептона, 20 мл дрожжевой воды, 5 г хлорида натрия х. ч. и 20 г агар-агара. Подогревают в кипящей водяной бане до полного растворения компонентов, ох­лаждают до 60 ос и устанавливают рН среды 7,2-7,3 10%-ным раствором ед­кого натра. Затем, среду прогревают текучим паром в течение 30 мин фильтруют через ватно-марлевый фильтр, предварительно смоченный теплой водой и хорошо отжатый. К фильтрату добавляют 1 г глюкозы и 0,2 г бисульфита натрия (NаНSОз) и вновь устанавливают рН 7,2-7,3. Среду разливают в посуду и стерилизуют текучим паром 40 мин, а потом дополнительно при 0,4 ати (110⁰С) в течении 20 мин.