Определение самоагглютинирующих штаммов

На тщательно очищенное предметное стекло помещают каплю физиологического раствора. Диспергируют в этой капле часть тестируемой колонии так, чтобы получилась гомогенная и густая суспензия.

Покачивают осторожно стекло в течение 30 – 60 с. Отмечают результаты на темном фоне, лучше с помощью увеличительного стекла. Если наблюдается в разной степени склеивание бактерий, то есть образование осадка, то считают, что тестируемые штаммы обладают самоагглютинацией.

Штаммы бактерий, обладающие самоагглютинацией, не подвергают дальнейшей серологической идентификации.

Определение наличия О-антигена

Штаммы, у которых не выявлено самоагглютинации, испытывают в реакции агглютинации с агглютинирующими адсорбированными поливалентными сальмонеллезными сыворотками основных групп А, В, С, Д, Е, а затем, если не выявлено 0-антигенов с сыворотками основных групп, ставят реакцию с сыворотками редких групп.

Подготовка сывороток к постановке реакции агглютинации и методика ее проведения указаны в наставлении, прилагаемом к сывороткам.

Агглютинация (наличие О-антигенов) проявляется в виде склеивания бактериальной массы и полного или частичного просветления жидкости.

При отрицательной реакции агглютинации культура после тщательного смешивания с каплей сыворотки образует гомогенную смесь.

При определении биохимических и серологических характеристик выделенных культур в качестве контроля используют типичный по этим показателям штамм бактерий рода Salmonella.

Обработка результатов

Результаты оценивают по каждой пробе отдельно.

Интерпретация результатов биохимических и серологических испытаний

Культуры, показавшие типичные биохимические и серологические реакции, относят к бактериям рода Salmonella.

Предположительно к бактериям рода Salmonella относят:

- культуры, у которых не обнаружено самоагглютинации и О-антигенов, но показавшие типичные биохимические реакции;

- культуры, у которых обнаружена самоагглютинация и типичные биохимические реакции. Культуры, у которых не обнаружено самоагглютинации, не давшие типичных биохимических и серологических реакций, не относят к бактериям рода Salmonella.

Результаты выявления бактерий рода Salmonella в определенной навеске продукта записывают: «бактерии рода Salmonella обнаружены в X г (см³) продукта» или «бактерии рода Salmonella не обнаружены в X г (см³) продукта». Х-масса (объем) навески продукта, в которой выявляли бактерии рода Salmonella.

Таблица 3 – Биохимическая характеристика некоторых подвидов рода Salmonella вида Salmonella enterica

Наименование биохимических характеристик	Sа1mоnеllа enterica (I)	Sа1mоnеllа salamae (II)	Sа1mоnеllа аrizonae (III a)	Sа1mоnеllа houtenae (IV)
Образование индола	-	-	-	-
Образование ацетона	-	-	-	-
Образование Н2S на трехсахарном агаре	+	+	+	+
Расщепление мочевины	-	-	-	-
Подвижность	+	+	+	+
Сбраживание глюкозы с образованием газа	+	+	+	+
Сбраживание глюкозы с образованием кислоты	+	+	+	+
Сбраживание лактозы	-	-	d	-
Сбраживание сахарозы	-	-	-	-
Сбраживание маннита	+	+	+	+
Условные обозначения: «+» - 90-100 % штаммов положительны; «+» - 76 – 89 % штаммов положительны; «d» - 26-75 % штаммов положительны; «-» - 0-10 % штаммов положительны.

Контрольные вопросы.

1. Какова последовательность исследований для выявления и определения количества бактерий рода сальмонелл?

2. В чем сущность метода?

3. Каковы морфологические, культуральные и биохимические свойства сальмонелл?

4. В чем заключается постановка РА на предметном стекле для идентификации сальмонелл?

Основная литература

1. Микробиологический контроль мяса животных, птицы, яиц и продуктов их переработки: справочник / С.А. Артемьева, Т.Н. Артемьева, А.И. Дмитриев, В.В. Дорутина – М.: КолосС, 2003. – 288 с.

2. Нецепляев, С.В. Лабораторный практикум по микробиологии пищевых продуктов животного происхождения / С.В. Нецепляев, А.Я. Панкратов– М.: Агропромиздат, 1990. – 223 с.

3. Санитарная микробиология: учебник для вузов / Любашенко С.Я. [и др.]; под ред. С.Я. Любашенко. – М.: Пищевая промышленность, 1980. – 352 с.