Методы микробиологической диагностики

Микробиологическая диагностика включает в себя 5 методов: микроскопический, микробиологический (культуральный), биологический, серологический и аллергологический.

Микроскопический метод – это метод исследования, включающий в себя приготовление микроскопических препаратов (нативных или окрашенных простыми и сложными способами) из исследуемого материала и их изучение с применением различных видов микроскопической техники (световая, темно-полевая, фазово-контрастная, люминесцентная, электронная и др.). В бактериологии этот метод называют бактериоскопический, а в вирусологии – вирусоскопическим.

Микробиологический (культуральный) метод – это метод исследования, включающий в себя посев исследуемого материала на питательные среды с целью выделения и идентификации чистой культуры возбудителя. В бактериологии культуральный метод получил название бактериологического, в микологии – микологического, в протозоологии – протозоологического.

Биологический метод (экспериментальный), биопроба – это метод исследования, включающий в себя заражение исследуемым материалом чувствительных лабораторных животных. Этот метод используют для выделения чистой культуры возбудителя, определения типа токсина и активности антимикробных химиотерапевтических препаратов.

Серологический метод - это метод исследования, основанный на определении специфических антител в сыворотке крови больного при использовании серологических реакций.

Аллергологический метод заключается в выявлении инфекционной аллергии (ГЗТ) на диагностический микробный препарат – аллерген. С этой целью ставят кожные аллергические пробы с соответствующими аллергенами.

Особое значение приобретают методы экспресс – диагностики, которые позволяют поставить микробиологический диагноз в течение короткого промежутка времени (от нескольких минут до нескольких часов) с момента доставки исследуемого материала в лабораторию. К этим методам относятся РИФ, ИФА, РИА, ПЦР, газовая хроматография и др.

В вирусологии методы лабораторной диагностики вирусных инфекций имеют свою специфику, учитывая особенности биологии вирусов. Используются три метода лабораторной диагностики: вирусоскопический, вирусологический и серологический. Вирусоскопический метод заключается в обнаружении вируса в исследуемом материале под микроскопом, чаще используют электронный микроскоп, реже люминесцентный. Световая микроскопия практически не применяется из-за ничтожно малых размеров вирусов, с её помощью можно выявить внутриклеточные вирусные включения (тельца Пашена, Гварниери и др.). Вирусологический метод заключается в заражении исследуемым материалом лабораторных животных, куриных эмбрионов или культуры клеток, индикации вируса и его последующей идентификации.

Особенностью серологического метода в вирусологии является исследование парных сывороток. Первую сыворотку берут у больного в начале болезни, хранят при температуре 4-8°С, а вторую сыворотку берут через 10 – 14 дней. Сыворотки исследуют одномоментно. О заболевании свидетельствует сероконверсия, т.е. нарастание титра антител во второй сыворотке по сравнению с первой. Диагностически значимой является конверсия в 4 раза и выше.