Методика:
Приготовить нервно-мышечный препарат лягушки "седалищный нерв - икроножная мышца", как это описано в работе №1. Для регистрации мышечных сокращений на кимографе необходимо закрепить препарат в специальной пластмассовой камере, расположенной на штативе. Предварительно смочить раствором Рингера с помощью пипетки ванночку камеры и удалить из нее излишек жидкости. Проследить, чтобы электроды, находящиеся в камере, не замыкались каплей раствора. Взять нервно-мышечный препарат руками или пинцетом за бедренную кость и фиксировать последнюю винтом в прорези сбоку камеры. Придерживая пинцетом косточку от позвоночника, положить нерв препарата на электроды камеры. Закрыть ванночку камеры вместе с расположенным в ней нервом стеклянной пластинкой, смоченной раствором Рингера. Нить, соединенную с сухожилием икроножной мышцы, привязать к изогнутой в виде крючка булавке и последнюю острием продеть в отверстие короткого плеча рычажка миографа, укрепленного на штативе над пластмассовой камерой. Мышцу осторожно обернуть тонким слоем ваты и, с целью предохранения ее от высыхания, обильно полить из пипетки раствором Рингера.
Для создания оптимального режима сокращения мышцы произвести: отягощение ее, подвесив на длинное плечо рычажка миографа грузик весом около 5 граммов. Следует помнить, что чем дальше от оси вращения рычажка будет располагаться груз, тем больше будет степень отягощения мышцы. Амплитуда сокращения при средних степенях отягощения - наибольшая. Следует учесть также, что чем ближе к оси вращения рычажка будет располагаться крючок, соединенный с мышцей, тем больше будет амплитуда мышечных сокращений. Мышца и соединенная с ней нить должны располагаться вертикально, рычажок миографа - горизонтально.
Перед записью рычажок миографа следует расположить по касательной к поверхности барабана кимографа так, чтобы укрепленное на нем перо было слегка прижато к бумаге, натянутой на барабан.
а) Запись различных видов сокращений скелетной мышцы: одиночных и суммированных (зубчатого и гладкого тетанусов).
Найти порог раздражения препарата для одиночных электрических импульсов, получаемых от электронного стимулятора. Затем увеличить силу тока до такой величины, которая вызывает хорошо выраженные сокращения мышцы. Установить кимограф на максимальную скорость вращения барабана. Несколько раз, с интервалом в 2-3 секунды, подвергнуть нерв препарата раздражению сверхпороговыми одиночными электрическими стимулами, записывая при этом сокращения мышцы на кимографе. Затем, не меняя силы тока, раздражать нерв последовательно сериями раздражений с частотой 1, 2, 6, 10, 20 и 50 имп/с. (рис. 1). Каждая из серий раздражений должна длиться не более 2-4 секунд. Интервал между сериями должен бытъ порядка 10-20 секунд. Записывать сокращения мышцы на барабане следует при несколько меньшей скорости его вращения, чем при одиночной стимуляции нерва.
Полученные результаты занести впротокол и сделать вывод об условиях возникновения зубчатого и гладкого тетануса в зависимости от частоты раздражения.
Рис. 1 Пример из опыта. Верхняя кривая – запись сокращений.
Нижняя кривая – отметка раздражения.
Цифры по кривой – частота раздражения в 1 секунду.
б) Получение оптимума и пессимума частоты раздражений.
Подобрать на стимуляторе пороговую силу одиночного раздражения, то есть такую силу раздражения, которая вызывает едва заметное сокращение мышцы. Записать на кимографе одиночное сокращение. Постепенно увеличивая силу одиночного раздражения записать ряд раздражений вплоть до максимального одиночного сокращения. Затем, не меняя силы раздражения, последовательно записать отдельные тетанусы при частотах раздражения 10, 20, 30, 50, 100 и 200 имп/с.
Определить частоту раздражения, при которой амплитуда тетануса будет наибольшей (это оптимум сокращения и оптимум частоты). Определить частоту раздражения, при которой, несмотря на большую ее величину, тетанус по амплитуде оказался меньшим (это пессимум сокращений и пессимум частоты).
Обратить внимание на особенности формы тетанической кривой при оптимуме и при пессимуме.
Чтобы показать, что пессимум не является результатом утомления препарата, после применения пессимального раздражения сразу перейти к раздражению в оптимальном ритме: амплитуда тетануса снова будет больше (рис.2).
Рис.2. Пример из опыта. Верхняя кривая - запись сокращений.
Нижняя кривая - отметка раздражения.
Цифры под нижней кривой - частота раздражения в 1 секунду.
Полученные результаты занести впротокол. В выводах дать объяснение явлению оптимума и пессимума.
Результат:
Наклейте кимограмму или зарисуйте результат:
Вывод:
1. Одиночное сокращение состоит из следующих фаз:
1)________________________________________________;
2)________________________________________________.
2. Зубчатый тетанус – это _______________________________________________ ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
3. Гладкий тетанус – это ____________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
4. Почему амплитуда тетануса больше, чем амплитуда одиночного сокращения? ____ ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
5. Оптимум – это __________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
6. Пессимуми – это ________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
7. Почему наблюдается пессимум? ___________________________________________ ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
8. При какой частоте раздражения наблюдается пессимум? _______________________
9. Если бы Вы с такой же частотой проводили прямую стимуляцию мышцы, возник бы пессимум или нет? Почему? ____________________________________________ ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
10.
Работа №7