Рода Actinomyces
Таблица 66 - Свойства основных патогенных для животных видов
Таблица 65 - Родовые признаки Actinomyces
Признаки | Actinomyces | Nocardia | Streptomyces | Dermatophilus |
Отношение к кислороду | Анаэробы или капнофилы | Строгие аэробы | Аэробы | Аэробы/ капнофилы |
Каталаза | -(+) | + | + | + |
Частичная кислотоустойчивость при окраске по модифицированному методу Циль-Нильсена | - | + | - | - |
Подвижность | - | - | - | + (зооспоры) |
Рост на декстрозном агаре Сабуро | - | + | + | - |
Воздушные гифы | - | + | + | - |
Споры | - | + (конидии) | + (конидии) | + (зооспоры) |
Фрагментация гиф (нитей) | - | + | + | + |
Запах культуры | - | - | Острый, почвенный | - |
Метаболизм | Ферментация | Оксидация | Оксидация | Слабая ферментация |
Резервуар | Слизистые рта и носоглотки | Почва | Почва | Больные и животные-носители |
Ветеринарное значение | Локальные и системные болезни, характеризующиеся образованием гранулой на коже, подкожей и в органах | Не патогенны | Вызывают поражение кожи |
+ положительная реакция; - отрицательная реакция; - (+) преимущественно негативные реакции.
|
|
Идентификация представителей рода Actinomyces на видовом уровне. У выделенных культур, отвечающих родовым признакам Actinomyces, изучают с целью определения их видовой принадлежности более широкий круг ферментативных свойств.
Признаки | Вид | |||
A.bovis | A.viscosus | A.pyogenes | A.hordeovulneris | |
Наличие гранул в гное | Зелено-желтые гранулы (друзы) | Серо-белые гранулы (друзы) | - | -(+) |
Обнаружение при микроскопии мазков из исходного материала | Нити, ветвящиеся формы, реже дифтеройдные формы | Аналогично A. bovis | Короткие дифтеройдные формы | Аналогично A.bovis |
Отношение к кислороду | Анаэроб-капнофил | Аэроб-капнофил | Аэроб-капнофил | Аэроб-капнофил или анаэроб-капнофил |
Образование каталазы | - | + (слабая реакция) | - | + (слабая реакция) |
CAMP - тест с S. aureus | - | - | + | - |
Разжижение сыворотки в среде Леффлера | - | - | + (Через 24-48 ч) | - |
Биопроба. Заражение лабораторных животных в диагностике болезней этой группы обычно не применяют. A.pyogenes, например, проявляет слабую и вариабельную патогенность. При подкожном заражении A.pyogenes у животных развиваются подкожные абсцессы, внутрибрюшинном или внутривенном — возможен летальный исход.
Питательные среды и условия культивирования актиномицетов подбирают с учетом отношения конкретного вида к молекулярному кислороду, потребности в сыворотке крови и некоторых ростовых факторах.
Сердечно-мозговой бульон (пропись фирмы «Дифко», 1982). В 1000 мл дистиллированной воды растворяют мозгового отвара (сухой) — 12,5 г, сердечного отвара — 5,0 г, протеозопептона — 10,0 г, декстрозы — 2,0 г, натрия хлорида — 5,0 г, двунатриевого фосфата — 2,5 г. Устанавливают рН 7,4, стерилизуют при 121° С 15 минут.
|
|
Сердечно-мозговой агар. Готовят на основе сердечно-мозгового бульона, добавляя 2% агара. Среды пригодны для культивирования A.Israeli и A.bovis.
Czapek Dox-arap (пропись фирмы «Дифко», 1982). В 1000 мл дистиллированной воды растворяют натрия нитрата — 2,0 г, калия хлорида — 0,5 г, железа сульфата — 0,35 г, калия сульфата — 0,35 г, сахарозы-30 г, агара — 12 г. Стерилизуют при 115° С 20 минут, рН 6,8. Данная синтетическая среда рекомендуется для культивирования актиномицетов.
Мальтозный (глюкозный) агар Сабуро. В 1000 мл дистиллированной воды растворяют мальтозы (или глюкозы) — 4 г, пептона —1 г, агар-агара — 1,8 г. Среду фильтруют, разливают по колбам, пробиркам и стерилизуют при 110° С 15 минут. Для культивирования актиномицетов можно применять кровяной агар, среду Леффлера, тиогликолевые среды и среды, предназначенные для культивирования анаэробов, не содержащие специальных селективных добавок. Например, агар и бульон Шадлера (см. «Питательные среды для культивирования клостридий»). Во всех случаях надо учитывать, что A.pyogenes лучше растет на средах с кровью (сывороткой крови) и утилизируемыми углеводами, A.hordeovulneris — на средах с 15-20% фетальной сыворотки. Для изоляции ряда актиномицентов применяют питательные среды с селективными добавками.
Среда Бейгтона и Колмана. Состав питательной среды: сердечно-мозговой бульон — 3,7 г, дрожжевой экстракт (порошок) — 0,5 г, по-ливинилпироллидон — 1,0 г, цистеин солянокислый —0,1 г, агар — 1,5 г, вода дистиллированная — 100 мл. Компоненты растворяют, стерилизуют при 115° С 30 минут, охлаждают до 45° С и вносят 5 мл стерильной сыворотки крови кролика. Затем к 100 мл готовой питательной среды добавляют 1 мл раствора NaF (25 мг/мл), 0,5 мл стерильного раствора колистина сульфата (1 мг/мл). Эти растворы предварительно стерилизуют. Среду используют для культивирования оральных актиномицетов.
Среда Колмана и Лоше. В качестве основы используют обогащенную плотную среду. К основной среде добавляют метронидазола — 10 мкг/мл и кадмия сульфата — 20 мкг/мл. Кадмия сульфат стерилизуют автоклавированием вместе с основной средой, метронидазол фильтруют и вносят в среду на последнем этапе. Среда рекомендована для культивирования A.viscosus и A.naeslundii.
Лабораторная диагностика нокардиоза
В пределах рода Nocardia основным патогенным видом является
N. asteroides — возбудитель нокардиоза крупного рогатого скота, овец, собак и других видов животных. Вызывает легочной или системный но-кардиоз, опухолеподобные поражения в тканях, локальные кожные или подкожные поражения, хронические грануломатозные маститы у крупного рогатого скота, у собак часто наблюдаются пневмонии, плевриты, вплоть до поражения центральной нервной системы. При кожном нокар-диозе у крупного рогатого скота наблюдают грануломатозно-гнойное воспаление подкожной ткани и лимфатических сосудов. У свиней, овец вызывает пневмонии, маститы и лимфадениты, у кроликов — подкожные грануломатозные абсцессы или/и гнойно-грануломатозные поражения в грудной полости. Как патогенный вид этого рода также известен
N. brasiliensis, но он имеет распространение в Центральной и Южной Америке. Патогенны некоторые штаммы N. farcinica. Лабораторная диагностика нокардиозов основана на выделении культуры возбудителя и ее идентификации.