Разработка технологии выделения и очистки субстанции инсулина

Создание стабильного высокопроизводительного штамма-продуцента рекомбинантного инсулина и технологии его культивирования позволило провести комплексное исследование по разработке опытно-промышленной технологии получения активной фармацевтической субстанции ГИЧ. Процесс получения инсулина состоит из трех основных этапов: получения проинсулинсодержащего РБ в мономерной форме; получения ГИЧ из РБ (ферментативный гидролиз); очистки и кристаллизации цинковой соли инсулина.

1.4.1. Хроматографическая очистка рекомбинантного белка на анионите.

Очистка РБ осуществляется на сорбенте на основе ДЕАЕ-сефарозы в одну стадию, при этом получают белок преимущественно в мономерной форме (рис.).

Рис.. Электрофореграмма РБ в SDS-ПААГ. Дорожки 1-9 – фракции гибридного белка, полученные в процессе очистки на DEАE-сефарозе FF, дорожка 10 – калибровочные белки

Масштабирование и оптимизация перечисленных выше технологических стадий позволили значительно увеличить выход, в результате из 17 кг тел включения в промышленных условиях удалось получить 792 г РБ.