Техника. Препарат фиксируют любым способом, помещают на 5-12 ч в 1%-ный раствор сафранина, который готовят смешиванием 1%-ного раствора водорастворимого сафранина и воды (1:1); промывают в воде, затем в спирте, снова трехкратно в воде по 15 мин, затем помещают в 2%-ный водный раствор генцианового фиолетового на 30 мин, промывают водой и помещают в 1%-ный водный раствор оранжа на 1-3 мин, после чего промывают в гвоздичном масле.
Микроскопическая картина. Протоплазма окрашивается в розовый цвет, ахроматиновые элементы клетчатки – в фиолетовый, хроматиновые структуры – в красный.
Окрашивание гематоксилином Делафильда
Техника. Препарат фиксируют 35-50%-ным спиртом и помещают в краситель, для изготовления которого 1 г гематоксилина растворяют в 6 мл абсолютного спирта и этот раствор вливают по каплям в 100 мл насыщенного водного раствора аммонийных квасцов и оставляют стоять в течение недели, затем прибавляют по 25 мл глицерина и метилового спирта и фильтруют через 4 ч. Время окрашивания 3-30 мин. Препарат промывают в нескольких сменах воды 5-30 мин. Для дифференциации структур клетки к воде или спирту добавляют соляную кислоту (1 капля на 100 мл воды); После чего промывают 70%-ным спиртом и водой.
|
|
Микроскопическая картина. Ядра окрашиваются в красный цвет, протоплазма в фиолетовый.
Окрашивание гематоксилином и эозином (или эритрозином)
Техника. Препарат окрашивают гематоксилином Делафильда и дифференцируют подкисленным спиртом. Срезы объекта погружают в 1%-ный спиртовой раствор эозина (или эритрозина) на 1-2 мин, проводят через крепкие спирты, промывают как обычно.
Микроскопическая картина. Ядро и клетчатка окрашиваются в пурпурный цвет, протоплазма – в розовый. Особенно хорошо окрашиваются ржавчинные грибы.
Окрашивание борным кармином
Применяется при изучении ядер, хромосом и т.д.
Техника. В 100 мл воды, нагретой до 50°С, растворяют 4 г буры, добавляют 3 г кармина, а потом доливают 100 мл 70%-ного спирта и фильтруют. Препарат фиксируют любым способом, промывают, обезвоживают до 50% проводкой через спирты, погружают в краситель на 1-3 дня, промывают 70%-ным спиртом, подкисленным 1-2 каплями соляной кислоты, 2-3 дня.
Микроскопическая картина. Ядра окрашиваются в яркий розовый цвет.