Окрашивание методом HCl-Гимза

Особенно хорошо окрашива­ются ядра в гифах несовершенных грибов.

Техника. Препарат фиксируют метиловым спиртом, смесью спирта с формалином или жидкостью Карнуа по следующей схеме: Фиксация жидкости Карнуа 10 мин; промывка в 96%-ном спирте; выдерживание в 70%-ном спирте 30 мин; промывка в дистиллированной воде; выдерживание в холод­ной соляной кислоте 6 мин; гидролиз 4-6 мин при 60°С; про­мывка в холодной 1 н. соляной кислоте и дистиллированной воде; выдерживание 15 мин в буферном растворе (фосфатный бу­фер, pH 6,9), затем 30-40 мин в растворе Гимза (исходный раствор и буфер (1:1) готовят непосредственно перед употреб­лением).

Приготовление раствора Гимза: 3,8 г азурэозина раство­ряют в 125 мл глицерина при 60°С, добавляют 395 мл метилового спирта и фильтруют.

Микроскопическая картина. Ядра окрашиваются в синий цвет. При мик­роскопировании препарат помещают в глицерин.

Микроскопия вирусов

Как известно, вирусы не могут быть рассмотрены в свето­вом микроскопе, поэтому в световом микроскопе изучают включения или ткани, пораженные вирусом. Изменения, проис­ходящие в тканях, изучают с помощью методов и приемов гис­тологического исследования, которые рассматриваются в соот­ветствующих руководствах.

Препараты для микроскопирования элементарных телец и включений готовят из мазков и отпечат­ков органов и тканей. Подготовленные мазки немедленно фиксируют. С этой целью применяют простые и сложные фиксаторы. Среди простых чаще других употребляют метиловый спирт, смесь Никифорова (спирта и эфира поровну), ацетон. Среди сложных фиксаторов нашли применение следую­щие: 1) смесь Дюбоска-Бразиля-Буэна: пикриновой кислоты 1 г, имеющегося в продаже (40%) формалина 60 мл, спирта (80%) 150 мл и ледяной уксусной кислоты 15 мл; 2) сулемовые смеси: а) Шаудина: насыщенного раствора сулемы 2 части и абсолютного спирта 1 часть; б) Ценкера: сулемы 5 г, бихро­мата калия 2,5 г, сульфата натрия 1 г, ледяной уксусной ки­слоты 5 мл, дистиллированной воды 100 мл. Уксусную кислоту добавляют в смесь перед употреблением; в) Хелли-Макси­мова: сулемы 5 г, бихромата калия 2,5 г, имеющегося в про­даже неразведенного формалина 10 мл, 2% раствора осмиевой кислоты 10 мл, дистиллированной воды 100 мл. Формалин и ос­миевую кислоту добавляют смесь перед употреблением.

Окраска препаратов