Ингредиент, мл | Номер пробирки | |||||
Антиген в основном разведении | 0,5 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,1 | 0,05 |
Изотонический раствор натрия хлорида | 0,5 | 0,6 | 0,7 | 0,8 | 0,9 | 0,95 |
Комплемент (рабочая доза) | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
Термостат при температуре 37ºС в течение 1 ч
Гемолитическая система | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
Термостат при температуре 37ºС в течение 1 ч
Проведение основного опыта РСК. Общий объем ингредиентов реакции – 2,5 мл, объем рабочей дозы каждого из них – 0,5 мл. В первую пробирку вносят сыворотку в соответствующем разведении, антиген и комплемент, во вторую – сыворотку в соответствующем разведении, комплемент и изотонический раствор натрия хлорида (контроль сыворотки), в третью – антиген, комплемент и изотонический раствор натрия хлорида (контроль антигена). Одновременно готовят гемолитическую систему, смешивая по 2 мл гемолитической сыворотки в тройном титре (по отношению к указанному в инструкции) и 3% взвеси эритроцитов барана (по отношению к исходному объему крови). Пробирки выдерживают в термостате при температуре 37ºС в течение 1 ч, затем в первые 3 пробирки (первая система) добавляют по 1 мл гемолитической системы (вторая система). После тщательного смешивания ингредиентов пробирки вновь помещают в термостат на 1 ч при температуре 37ºС.