Методические указания к выполнению задания 42

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, или РПГА) является разновидностью реакции агглютинации, которая основана на способности эритроцитов адсорбировать на своей поверхности растворенные антигены и гаптены (бактерий, вирусов и других микроорганизмов). При этом эритроциты несут новую серологическую специфичность и вместе с ней способность агглютинироваться иммунными сыворотками, гомологичными адсорбировавшимся антигенам. Это – эритроцитарные диагностикумы, для получения которых эритроциты обычно подвергают обработке танином в разведении 1:20 000, под действием которого улучшается их адсорбционная способность. Реакцию ставят на полистероловых досках с лунками или в пробирках. Исследуемую сыворотку, предварительно инактивированную при t 58 °С в течение 30 мин для уничтожения комплемента, разводят от 1:10 до 1:12 000 и более, разливают в лунки по 0,5 мл. К каждому разведению сыворотки добавляют по 0,1 мл эритроцитарного диагностикума. Реакцию выдерживают в течение 2 ч при комнатной t или в термостате и считают положительной, если осадок эритроцитов имеет форму «зонтика» с зубчатыми краями и покрывает почти все дно пробирки. При отрицательном результате эритроциты оседают в центре дна лунки в виде компактного диска с ровными краями – в виде «пуговки».

Задание 43. Поставка реакции кольцепреципитации по схеме. Результаты внести в таблицу:

Задание 44. Рассмотреть демонстрации опытов. Зарисовать наблюдаемую картину, описать результаты.

Использовать:

- метод простой (одинарной) диффузии;

- двойной диффузии по Оухтерлони (для определений Ig, СРБ, Манчини, экзотоксина коринебактерий).

Методические указания к выполнению заданий 43 и 44