Техника посева

Навеску подготовленной почвы (1г) переносят в колбу со 100 мл стерильной водопроводной воды. Готовят разведение почвенной суспензии, для чего 1 мл суспензии из колбы последовательно переносят в ряд пробирок с 10 мл стерильной водопроводной воды.

Посев на плотные среды производится из разных разведений. Разведение для высева подбирают таким образом, чтобы на чашке развивалось 50-200 колоний. Из каждого образца берут не менее 3-х повторных навесок и каждую высевают не менее чем на 3 чашках.

На поверхность застывшей и подсушенной среды наносят каплю почвенной суспензии определенного разведения и с помощью стеклянного шпателя распределяют ее по всему агару. Засеянные чашки переворачивают вверх дном и помещают в термостат. Сроки учета микроорганизмов зависят от состава питательной среды и группы учитываемых микроорганизмов.

На МПА обычно на 2-3 сутки учитывают споровые и неспоровые формы бактерий. На среде Чапека на 5-7-е сутки учитывают колонии актиномицетов, на сусло-агаре на 5-7-е сутки – колонии грибов и дрожжей.

Подсчет количество колоний на чашке проводят обычно со дна чашки в проходящем свете. На месте подсчитанной колонии чернилами по стеклу или маркером ставится точка.

Подсчитав количества колоний на всех параллельных чашках, выставляют их среднее число на одной чашке и затем делают пересчет и определение содержания микроорганизмов в 1 г почвы по формуле

а=б×в×г,

где а - количество клеток в 1 г почвы;

б- среднее количество колоний на чашке;

в- разведение, из которого сделан посев;

г – количество капель в 1 мл суспензии.

Результаты обрабатывают статистически, рассчитывают ошибку среднего арифметического, среднее квадратичное отклонение, коэффициент вариации.

СПИСОК РЕКОМЕНДУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1.Асонов Н.Р. Практикум по микробиологии. М.: Колос, 1975. 160 с.

2.Практикум по микробиологии /Под ред. Н.С. Егорова. М.: Изд-во Моск.ун-та, 1976. 307 с.

3. Градова Н.Б., Бабусенко Е.С.Лабораторный практикум по общей микробиологии. М.: Изд-во РХТУ им.Менделеева, 1998. 116 с.

Лабораторная работа № 15

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ