Тема: Патофизиология печени.
Цель: Изучить причины и механизм развития недостаточности печени, формирование симптомов и синдромов при заболеваниях печени.
Теоретические вопросы.
1.Основные функции печени и экспериментальное моделирование их нарушений.
2.Печеночная недостаточность, определение понятия, классификация.
3.Этиология и патогенез печеночной недостаточности.
4.Патогенетические варианты печеночной недостаточности (холестатическая, печеночно-клеточная, смешанная).
5.Синдром печеночно-клеточной недостаточности, причины, проявления, методы диагностики.
6.Нарушения обмена веществ при печеночной недостаточности.
7.Нарушения барьерной и дезинтоксикационной функции печени.
8.Печеночная кома, виды, этиология, патогенез, стадии.
9.Портальная гипертензия, причины, механизм развития, проявления, последствия для организма.
Работа №1. Нарушение синтеза гликогена в печени при экспериментальной четыреххлористой интоксикации.
Материальное оснащение.
1. 50%-ный масляный раствор CCl4 | - 5 мл |
2. Шприц на 2 мл | - 2 шт. |
3. Пинцеты глазные | - 2 шт. |
4. Ножницы глазные | - 2 шт. |
5. Пробирка градуированная | - 2 шт. |
6. Стеклянная палочка | - 2 шт. |
7. 3%-ный раствор глюкозы | - 10 мл |
8. Раствор Бенедикта | - 15 мл |
9.Термостат, установленный на 380С | - 1 шт. |
10. Водяная баня | - 1 шт. |
Методика проведения опыта.
|
|
Четыре раза с суточным интервалом кролику вводят внутримышечно 50%-ный масляный раствор четыреххлористого углерода из расчета 0,4 мл чистого препарата на 1 кг массы тела, в результате чего развивается дистрофия печени. Берутся 2 кусочка печени здорового и пораженного кролика, растираются в пробирке стеклянной палочкой и заливают 3%-ным раствором глюкозы. Пробирки ставят на 30 минут в термостат.
После чего в каждую пробирку наливают по 5 мл раствора Бенедикта и 8 капель надосадочной жидкости, проба кипятится в течение 5 минут. Изменение концентрации сахара определяют по цвету осадка в пробирке. Полученные результаты обсуждаются и делаются выводы.
Таблица индикаторного определения осадка сахара в растворе
Зелено-желтое окрашивание | следы глюкозы |
Бледно-зеленое окрашивание | 0,08 – 0,1% |
Коричнево-зеленое окрашивание | 0,5% |
Желтое окрашивание | 1% |
Красное окрашивание | 2% |
Работа №2. Характеристика общетоксического действия желчи.
Материальное оснащение:
1. Шприц на 5 мл – 1 шт.
2. Препаровальная игла - 1 шт.
3. Цельная желчь (бычья) - 10 мл
4. Животные: лягушка - 1 шт.
Методика проведения опыта:
Лягушке вводят в подкожное лимфатическое пространство 2-3 мл желчи. Через 10-15 мин появляется резкая заторможенность: животное становится не способным перевертываться со спины на живот. При этом оно слабо реагирует на уколы иглой.
|
|
Работа №3. Влияние желчи на время рефлекса по Тюрку.
Материальное оснащение.
1. Шприц на 1 мл - 1 шт.
2. Ножницы большие - 1 шт.
3. Штатив с лапкой и крючком - 1 шт.
4. Секундомер - 1 шт.
5. 1% раствор серной кислоты в
стакане - 50 мл
6. Дистиллированная вода в
стакане - 50 мл
7. Цельная желчь (бычья) - 10 мл.
8. Животные: лягушка - 1 шт.
Методика проведения опыта:
Лягушку декапитируют и подвешивают за нижнюю челюсть к штативу. Нижнюю лапку обездвиженного животного погружают в 1% раствор серной кислоты 2-3 раза с интервалом в 5 мин. После каждого погружения конечность обмывают дистиллированной водой.
В исходном состоянии определяют среднее время рефлекса для указанного раздражения. Затем в лимфатическое пространство лягушки вводят 1 мл желчи и через 15 мин опыт повторяют. Результаты, полученные до и после введения лягушке желчи, сопоставляют. При обсуждении экспериментальных данных объясняют механизм изменения скорости проведения раздражающих импульсов по спинальной рефлекторной дуге при действии компонентов желчи.
Работа №4. Влияние желчи на деятельность сердца лягушки.
Материальное оснащение:
1. Деревянная дощечка для фиксации
лягушки - 1 шт.
2. Булавки - 10 шт.
3. Препаровальная игла - 1 шт.
4. Пинцеты глазные - 2 шт.
5. Ножницы глазные - 1 шт.
6. Часовое стекло - 1 шт.
7. Кимограф с лентой из белой
бумаги - 1 шт.
8. Чернила - 10 мл
9. Стеклянный чернильный писчик – 1 шт.
10. Рычажок Энгельмана - 1 шт.
11. Шприц на 2 мл с длинной иглой - 1 шт.
12. 10% раствор желчи на физиологическом растворе - 5 мл
13. 0,5% раствор новокаина - 5 мл
14. 0,65% раствор хлорида натрия - 100 мл
15.Раствор Рингера – 100 мл
16. Животные: лягушки - 2 шт.
Методика проведения опыта.
Две обездвиженных (разрушением спинного мозга) лягушки укрепляют на дощечке булавками брюшком вверх. Затем вскрывают грудную клетку, обнажают сердце, которое соединяют с рычажком Энгельмана для записи сердечных сокращений на ленте кимографа.
У первой лягушки после записи сердечных сокращений на поверхность сердца наносят несколько капель желчи и продолжают регистрацию этого параметра.
У второй лягушки также записывают сокращение сердца в исходном состоянии, а затем на его поверхность наносят 3-5 капель 0,5% раствора новокаина и через 5 мин после нанесения 5-7 капель раствора желчи вновь регистрируют число сердцебиений. После каждой аппликации желчи сердце отмывают физиологическим раствором.
У первой лягушки вырезают сердце, помещают его на часовое стекло с раствором Рингера и подсчитывают число сердечных сокращений в 1 мин. Затем в раствор Рингера добавляют 2-5 капель желчи и продолжают регистрацию сердцебиений.
Полученные результаты сопоставляют. Кривую записи на кимографе сердечных сокращений зарисовывают в тетрадях. В заключении обсуждаются вероятные механизмы изменений функции сердца под действием желчи.
Работа № 5. Влияние желчи на кровь.
Материальное оснащение:
1. Пробирки простые - 2 шт.
2. Пипетка на 1 мл - 1 шт.
3. Штатив на 5 гнезд - 1 шт.
4. Цитратная кровь (кровь смешивают
с 3,8% раствором цитрата натрия в
соотношении 9:1) -2 мл
4. 0,85% раствор хлорида натрия - 100 мл
5. Желчь (цельная) - 5 мл
Методика проведения опыта.
В две пробирки наливают по 0,5 мл цитратной крови, которую смешивают с физиологическим раствором в соотношении 1:4. Одну пробирку оставляют вкачестве контрольной, а в другую - добавляют несколько капель желчи, что ведет к гемолизу эритроцитов ("лаковая" кровь).
В заключении обсуждаются возможные механизмы гемолитического действия компонентов желчи.